在平時(shí)的生活場(chǎng)所你可能很難看到PCR八聯(lián)管,但在生物實(shí)驗(yàn)室中,它可是一位“???rdquo;,是用于PCR實(shí)驗(yàn)的塑料離心管,材料是用最高等級(jí)的醫(yī)用級(jí)聚丙烯配方改良而成。采用光學(xué)平蓋,使整個(gè)蓋看起來(lái)光滑明亮,沒(méi)有任何痕跡,大大提高了PCR檢測(cè)器的時(shí)間通過(guò)率。
PCR八聯(lián)管用戶可以選擇負(fù)壓或離心
A、負(fù)壓法
1、正確連接負(fù)壓裝置,將96孔DNA制備板放在負(fù)壓裝置上;在PCR,酶消化,酶標(biāo)記或測(cè)序反應(yīng)溶液中加入3倍緩沖液PCR-A(如果緩沖液PCR-A小于100μl,加入100μl);充分混合并轉(zhuǎn)移至96孔DNA制備板,打開并調(diào)節(jié)負(fù)壓至-25-30英寸汞柱,并緩慢吸出板中的溶液。
2、加入0.3ml緩沖液W2并吸收溶液。用相同的方法用0.3ml緩沖液W2洗滌兩次。
確認(rèn)在試劑瓶上的指定體積的緩沖液W2濃縮物中加入無(wú)水乙醇。
3、維持負(fù)壓并提取96孔DNA制備板10分鐘。
4、在長(zhǎng)纖維組織上將96孔DNA制備板粉碎6次,引流管朝下。
5、將96孔DNA制備板置于96孔V形板上,加入25-30ul水或洗脫至膜中心,在室溫下靜置1分鐘。通過(guò)以3000×g離心5分鐘洗脫DNA。
B、離心
1、在PCR,消化,酶標(biāo)記或測(cè)序反應(yīng)中加入3倍體積的BufferPCR-A(如果BufferPCR-A小于100μl,加100μl);混合并轉(zhuǎn)移到制備板96孔中的96孔DNA中。將DNA制備板置于96孔1.6ml深孔板中,以1000×g離心1分鐘,棄去濾液。
2、在96孔DNA制備板中,加入0.3ml緩沖液W2,以1000×g離心1分鐘,棄去濾液。用0.3ml緩沖液W2以相同方式再次洗滌。確認(rèn)在試劑瓶上的指定體積的緩沖液W2濃縮物中加入無(wú)水乙醇。
3、將96孔DNA制備板置于96孔1.6ml深孔板中,并以3000×g離心10分鐘。
4、將96孔DNA制備板置于干凈的96孔V形底板中,加入25-30ul水或洗脫至膜中心,在室溫下靜置1分鐘。通過(guò)以3000×g離心5分鐘洗脫DNA。
注意事項(xiàng):
1、將洗脫液或水加熱至65°C有助于提高洗脫效率。
2、DNA分子是酸性的,建議儲(chǔ)存在2.5mMTris-HCl,pH8.5洗脫液中。