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必知干貨—DAB染色液的使用方法及注意事項

更新時間:2023-03-13    點擊次數(shù):3191

  必知干貨—DAB染色液的使用方法及注意事項


  DAB染色液用于免疫組化染色,應用在Dako 自動染色系統(tǒng)上。

  DAB染色液的使用方法

  1.DAB顯色液配制

  10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基聯(lián)苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,顯色時加入5-10mL 30%H2O2 混勻后立即使用

  2. 顯色

  準備好含有待測蛋白的固相膜:包括電泳、轉印、封阻、一抗(或生物素)處理、辣根過氧化酶(HRP)標記的二抗(或鏈霉親和素)處理、清洗等步驟。

  3.加入適量的DAB顯色液,鋪滿整個固相膜表面(可按比例增減)。

  4. 置于平式搖蕩儀上,在室溫下孵育2至5分 鐘,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出現(xiàn)。

  5.用鑷子夾起固相膜,放進無離子水里清洗。

  6.空氣中晾干。

  7. 拍照記錄 。

  DAB染色液的注意事項

  1. DAB溶液應低溫密封保存。如有結晶析出,應確保結晶溶解再行使用;

  2. 顯色工作液應現(xiàn)用現(xiàn)配,新鮮配制的工作液應為無色或淺棕色,如顏色過深,請勿使用;

  3. DAB在常溫下不穩(wěn)定,每次取用后均應及時加蓋密封放回冰箱,以免因DAB分解影響實驗,或因滲漏造成實驗環(huán)境污染;

  4. DAB有潛在致突變作用,操作時應注意穿戴好防護用具。

  DAB染色液 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。


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