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干貨分享:細胞培養(yǎng)板細胞布不均勻原因及處理措施
BUNSEN本生細胞培養(yǎng)板與酶標板的區(qū)別:
首先:都用多孔培養(yǎng)板測吸光度肯定可以,可以用它來做樣品的蛋白定量和MTT檢測。
區(qū)別:酶標板一般要比細胞培養(yǎng)板貴,細胞板主要做細胞培養(yǎng),但也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,一般不能用做細胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應后的蛋白檢測,它需要更高的要求還需要特定的酶標工作液。
BUNSEN本生細胞培養(yǎng)板細胞布不均勻的原因和處理措施:
先要搞清細胞是如何混勻的,是滴管吹打還是振蕩培養(yǎng)板,如果是后者,而且是轉(zhuǎn)圈搖勻的話,很有可能由于離心力的作用使細胞甩到周邊部分,導致細胞中間少,四周多。
當然,也有可能是培養(yǎng)板的質(zhì)量問題或是鋪板時細胞密度太低。對此可在培養(yǎng)種板之前,把培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱里進行幾個小時的飽和后再取出,種入細胞時力量要輕,可采取用滴頭在培養(yǎng)板孔的側(cè)面慢慢加入讓細胞懸液流入板孔中,培養(yǎng)的細胞基本是均勻生長。記住千萬不要用振蕩器振蕩,否則你的細胞就會聚積在一起。
還有些可行的處理方法:加入前吹打均勻;從多孔板側(cè)邊或底邊緩慢加入。在進行原代培養(yǎng)時遇到該現(xiàn)象,可能有些人以為培養(yǎng)皿鋪膠不均勻會導致這種現(xiàn)象,因為混勻的血管段加入到培養(yǎng)皿中時,在顯微鏡下血管段均勻分布在培養(yǎng)皿中,二十四小時后貼壁的血管段就是周邊多,中間相對少些。
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