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小鼠ELISA試劑盒血清血漿取血及注意事項
大鼠、小鼠ELISA試劑盒檢測中,經(jīng)常有客戶采用鼠類的血清,血漿做檢測樣本,但是收集樣本復(fù)雜,現(xiàn)根據(jù)大鼠,小鼠ELISA試劑盒樣本取血及注意事項。
以小鼠為例:
1 剪尾采血
小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml。
左手拇指和食指從背部抓住鼠頸部皮膚,將鼠頭朝下,鼠保定后將其尾巴置于50℃熱水中浸泡數(shù)分鐘,使尾部血管充盈。擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm,用試管接流出的血液,同時自尾根部向尾尖anmo。取血后用棉球壓迫止血并用6%液體火棉膠涂在傷口處止血。
2 摘除眼球采血
小鼠采血量0.5-1ml 左手抓住小鼠頸部皮膚,輕壓在實驗臺上,取側(cè)臥位,左手食指盡量將小鼠眼周皮膚往頸后壓,使眼球突出。用眼科彎鑷迅速夾去眼球,將鼠倒立,用器皿接住流出的血液。采血完畢立即用紗布壓迫止血。大鼠少用。
3 心臟采血
小鼠采血量0.5-0.6ml,大鼠采血量1-1.5ml 鼠仰臥位固定,剪去胸前區(qū)被毛,皮膚消毒后,用左手食指在左側(cè)第3-4肋間觸摸到心搏處,右手持帶有4-5號針頭的注射器,選擇心搏zui強處穿刺,當(dāng)刺中心臟時,血液會自動進入注射器。
4 斷頭采血
小鼠采血0.8-1.2ml,大鼠采血量5-10ml 左手拇指和食指從背部抓住鼠頸部皮膚,將鼠頭朝下,右手用剪刀剪斷鼠頸部約1/2-4/5,讓血液流入試管。
5 眼眶靜脈叢采血小鼠采血量為0.2-0.4ml,大鼠采血量為0.4-0.8ml 取內(nèi)徑為1.0-1.5mm的玻璃毛細管,臨用前折斷成1~1.5cm長的毛細管段,浸入1%肝素溶液中,干燥后用。取血時左手抓住鼠兩耳之間的頸背部皮膚以固定頭部,輕輕向下壓迫頸部兩側(cè),引起頭部靜脈血液回流困難使眼眶靜脈叢充血,右手持毛細管由內(nèi)眥部插入結(jié)膜,再輕輕向眼底部方向推進,輕輕旋轉(zhuǎn)毛細管以劃破靜脈叢,讓血液順毛細管流出,接收入事先準備的容器中。采血后紗布輕壓眼部止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采取此法取血。刺入深度小鼠為2-3mm,可采血0.2-0.3ml;大鼠為4-5mm,可采血0.4-0.8ml。
(以上采血均需注意,防止毛絮進入血液導(dǎo)致溶血等,另外就是防止劇烈的晃動,一般采集后須靜置,并離心收集血清(或血漿);分離之前不可冷凍。分離之后的血清(漿)可視情況進行凍存處理。)
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